TSA对滩羊成纤维细胞作为供体细胞的作用

• 作者: 关伟军 姚雅馨 李向臣 梁素丽 王义鹏 马月辉
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 滩羊 TSA 成纤维细胞 乙酰化
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 410-416
• 分类号: S827|S814.8
• 字数: 5486字
• 语种: 中文

摘要

为探索成纤维细胞作为供体细胞的潜能和Trichostatin A(TSA)处理供体细胞的适合浓度,提高克隆胚胎的发育水平.本研究分别利用100、50、25、10 ng·mL~(-1)TSA处理滩羊成纤维细胞,观察细胞形态,统计细胞活率,利用流式分选技术分析处理前后细胞的周期时相,同时通过间接免疫荧光法检测细胞乙酰化水平,并以经过10～50 ng·mL~(-1)TSA处理的成纤维细胞作为供体细胞,检测其重构胚发育水平.结果发现,当TSA的浓度达100ng·mL~(-1)时,细胞大量死亡,不同浓度TSA处理细胞24 h后,细胞周期被明显抑制在G_0/G_1期,乙酰化水平明显高于对照组,其中供体细胞经10 ng·mL~(-1) TSA处理的克隆胚胎卵裂率和囊胚率明显升高(P<0.05,(85.2±3.4)%vs(68.6±6.7)%,(35.6±5.7)%vs(10.4±8.3)%).结果表明,经10 ng·mL~(-1)TSA处理的滩羊成纤维细胞周期同步化明显,乙酰化维持较高水平,重构胚胎发育水平明显提高,适合作为成纤维细胞的处理方法和浓度.