LPS和雨蛙肽诱导大鼠离体胰腺组织损伤并抑制HSP60蛋白的变化

• 作者: 冯佳燕 吕帅 方蕾蕾 李永渝 李琨 李艳娜 高志荣
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 急性胰腺炎 离体胰腺组织 热休克蛋白质60
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1146-1150
• 分类号: R363.2
• 字数: 4685字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2010.06.020

摘要

目的:观察脂多糖(LPS)、雨蛙肽(cerulein)刺激对大鼠离体胰腺组织热休克蛋白60(HSP60)表达的影响.方法: 分离培养大鼠离体胰腺组织,用低、高浓度cerulein (Cer;10-11mol/L,10-5mol/L)或LPS(10 mg/L,20 mg/L)刺激,以生理盐水(NS)作为对照,在刺激前和刺激后1、4h测定胰腺组织的活力(MTT法)、胰蛋白酶原活性肽(TAP)水平(ELISA测定),培养上清液中白介素6(IL-6)水平(ELISA测定);并用 real-time PCR和Western blotting分别测定胰腺组织HSP60 mRNA和蛋白的表达.结果: 低、高浓度的cerulein和LPS刺激胰腺组织后1 h,组织的活力与NS对照组比较稍有下降(P>0.05),刺激4h后,组织活力明显降低(P<0.05);组织中TAP水平在高浓度cerulein和低、高浓度的LPS刺激下明显升高;其培养上清液中IL-6水平在刺激后1 h变化不明显,4 h时升高,尤其以高浓度的cerulein或LPS作用显著(P<0.05).胰腺组织HSP60 mRNA和蛋白的表达量随LPS刺激时间的延长和浓度的升高而降低;而低、高浓度的cerulein刺激HSP60 mRNA的表达增加,但蛋白的表达降低,以高浓度、长时间刺激的作用为明显(P<0.05).结论: LPS及cerulein对离体胰腺组织具有损伤作用,并呈一定时间及浓度依赖性;同时,胰腺组织HSP60蛋白表达降低,提示HSP60细胞保护作用的减弱可能参与该损伤过程.