摘要:
为了研究Sox9基因在西伯利亚鲟侧线神经发育过程当中所起的调控作用.本研究利用RT-PCR和RACE方法获得了西伯利亚鲟Sox9基因eDNA全长序列,经序列分析表明,所克隆Sox9 cDNA全长为1 409 bp,包括开放阅读框(open reading frame,ORF)1 083 bp,5'端非翻译区(untranslated region,UTR)19 bp和3'端非翻译区(untranslawM region,UTR)307 bpol 083 bp的ORF共编码360个氨基酸,相对分子质量为4l 221.7 U.序列分析表明,其与施氏鲟的亲缘关系较近,其次是斑马鱼.经实时荧光定量PCR技术对西伯利亚鲟Sox9基因在各组织以及在胚胎发育各时期中的相对表达量检测发现,Sox9在西伯利亚鲟中的表达具明显的组织差异性和时间差异性.其中,在肝,肾,肌肉,胰中的相对表达量较低.然而,大脑组织中的表达量与以上4个组织相比,处于极高水平,达到胰脏中相对表达量8.9倍,达到表达量最低点肾脏中的近21倍.在胚胎发育的不同阶段,Sox9均有表达.在原肠期、神经胚期及视泡形成期,Sox9基因的表达量均较高,特别是在原肠期其表达量达到西伯利亚鲟整个胚胎发育期的最高点,相当于表达量最低点心脏形成期的1.9倍.在神经胚期和视泡形成期,Sox9的相对表达量也相对处于较高水平,仅比原肠期略低,其相对表达量是心脏形成期1.2倍和1.4倍.本研究将为今后深入研究Sox9基因在西伯利亚鲟侧线神经节分化发育、细胞迁移过程中所起的调控作用积累资料.