Daxx与雄激素受体结合的功能片段筛选

• 作者: 庹勤慧 廖端芳 徐桂娜 朱炳阳 郭琰
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Fas死亡结构域相关蛋白 雄激素受体 GST Pull-Down
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 931-934
• 分类号: R96
• 语种: 中文

摘要

目的 体外筛选出能与雄激素受体具有相互作用的Daxx结构域.方法 应用聚合酶链反应扩增Daxx四个不同功能结构域,分别连接到带有GST标记的原核表达质粒pGEX-6p-1中,构建Daxx四个功能结构域的原核表达载体.经测序鉴定转化E Coli.BL21DE3菌株,经氨苄青霉素筛选并扩增阳性克隆,用IPTG诱导蛋白表达后纯化蛋白,采用GST pull-down体外筛选出与雄激素受体具有相互作用的Daxx功能结构域.结果 Daxx不同功能结构域的四个原核表达载体pGEX-6p-1/Daxx/DM1-240、pGEX-6p-1/Daxx/DM241-501、pGEX-6p-1/Daxx/DM502-625和pGEX-6p-1/Daxx/DM626-740经琼脂糖凝胶电泳和DNA测序分析,证实插入质粒的片段大小正确,无读码框移位和突变.IPTG诱导后蛋白表达具有明显差异性,表达蛋白与预期表达蛋白质分子量大小相当.纯化蛋白进行GST pull-down实验结果显示Daxx与雄激素受体具有相互作用.结论 Daxx通过第626-740位氨基酸序列与雄激素受体相互结合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱炳阳	南华大学药物药理研究所	86	668	15.0	20.0
2	廖端芳	南华大学药物药理研究所	190	1734	19.0	31.0
3	庹勤慧	南华大学药物药理研究所	29	156	7.0	11.0
4	徐桂娜	南华大学药物药理研究所	2	2	1.0	1.0
5	郭琰	南华大学药物药理研究所	3	7	2.0	2.0