2株胞内分枝杆菌临床分离株的鉴定

• 作者: 万康林 张媛媛 潘爱珍 王心 赵秀芹
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 分枝杆菌 结核分枝杆菌 胞内分枝杆菌 菌种鉴定
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 218-221
• 页数: 4页
• 分类号: R378.9
• 字数: 3011字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.03.007

摘要

目的 联合应用多种分子生物学技术进行分枝杆菌菌种鉴定.方法 从经PNB、TCH鉴别培养基鉴定为结核分枝杆菌的临床分离菌株285株中选取6株,其中包括oxyR-ahpC基因间隔区检测时PCR产物分子量异常的2株和另外随机选择的PCR产物分子量正常者4株,采用H37Rv、鸟分枝杆菌95001和胞内分支杆菌95002做对照,PCR扩增oxyR-ahpC基因间隔区,对其产物进行测序和网上同源性(H37Rv、U18263、U71061)比对.同时,采用多位点PCR扩增和hsp65 PCR-限制性酶切片段长度多态性分析,从而判定分枝杆菌菌种类型.结果 经PNB、TCH鉴别培养基鉴定初步判定为结核分枝杆菌的285株临床分离株中2株临床菌株oxyR-ahpC基因间隔区PCR产物大小约为1 000bp,DNA序列与胞内分枝杆菌同源性极高,达99%,而与同片段序列结核分枝杆菌H37Rv的差异大,同源性为84%.多位点PCR指纹显示为非分枝结核杆菌,hsp65 PCR-RLFP/RFLP指纹与95002一致.结论 2株oxyR-ahpC基因间隔区PCR产物分子量异常的经PNB、TCH鉴别培养基鉴定为结核分枝杆菌的临床分离株确定为胞内分枝杆菌.多种分子生物学技术联合应用能够快速、简便、更准确地鉴定分枝杆菌菌种.