草鱼呼肠孤病毒衣壳蛋白VP7基因真核表达载体pCI-VP7的构建及鉴定

• 作者: 姚嘉赟 尹文林 徐洋 沈锦玉 潘晓艺 郝贵杰
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 草鱼呼肠孤病毒 衣壳蛋白 转染 真核表达
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 807-813
• 分类号: Q786|S917
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2010.06662

摘要

将编码草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)主要衣壳蛋白VP7 0.9 kb的基因片段连接至克隆载体pMD19-T中,筛选阳性克隆并测序,经检测为正确序列后,再将目的片段克隆入真核表达载体pCI,筛选得到阳性重组质粒pCI-VP7.然后构建pCI-VP-GFP重组表达质粒(即GFP基因与VP7的一段上游基因融合表达),用PCR及酶切方法鉴定克隆的正确性.并用脂质体法将其转染入真核细胞COS-1和CIK进行瞬时表达,荧光显微镜观察及RT-PCR特异性检测.结果表明,GFP基因与VP7的一段上游基因被成功转染到COS-1和CIK细胞,并得到了很好的表达.进而证明pCI-VP7可以成功的表达,为GCRV基因疫苗的研制提供了实验资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝贵杰		52	439	13.0	17.0
2	沈锦玉		91	1304	20.0	32.0
3	徐洋		44	309	11.0	15.0
4	潘晓艺		67	785	16.0	25.0
5	尹文林		75	1203	20.0	31.0
6	姚嘉赟		37	255	9.0	14.0