甲型H1N1流感病毒血凝素蛋白单抗杂交瘤细胞株的制备与初步鉴定

• 作者: 周为民 周剑芳 张陵林 王慧娟 王文玲 舒跃龙 许洪林 谭文杰 阮力
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 新型甲型H1N1流感病毒 HA抗原 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 51-53,76
• 页数: 4页
• 分类号: Q813.2
• 字数: 2579字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.01.012

摘要

目的:建立具有高特异、高效价的甲型H1N1流感病毒血凝素蛋白(HA)单抗的杂交瘤细胞株.方法:以纯化的昆虫杆状病毒表达的甲型H1N1流感病毒HA蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,通过有限稀释法筛选阳性克隆,经ELISA和Western blot分析单抗的特性和特异性.结果:获得6株甲型H1N1流感HA抗原特异单克隆抗体杂交瘤细胞株,抗原肽库ELISA检测结果表明其中3株(1E12,3F12,1C11)单抗只与甲型H1N1流感HA抗原肽库反应,不与H5N1病毒HA抗原肽库反应;Western blot分析表明,单抗183只特异识别甲型H1N1流感HA抗原,而与其他季节性甲流病毒(H1,H3)及人禽流感H5N1病毒不反应.结论:所获杂交瘤细胞株特异性强,效价高,分泌抗体性能稳定,为分析甲型H1N1流感病毒抗原性位点、建立诊断试剂奠定了基础.