人骨髓间充质干细胞分化为上皮样细胞的初步研究

• 作者: 侯光辉 刘小浩 叶楠 吴静 张泽华 徐锦堂 施文建 陈义
• 来源期刊: 中华眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 间质干细胞 细胞分化 角膜 上皮样细胞 组织工程
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 页码范围: 719-724
• 分类号: R77
• 字数: 4700字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4081.2010.08.010

摘要

目的 应用猪板层角膜做载体将人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hMSC)跨胚层诱导为上皮样细胞,甚至角膜上皮样细胞,初步探讨hMSC作为构建组织工程角膜种子细胞的可行性.方法 实验研究.用密度梯度离心培养技术结合贴壁培养法分离纯化hMSC并传代,对体外培养的hMSC进行免疫表型鉴定.将传代后的hMSC接种于去上皮的猪角膜基质片前弹力层表面培养诱导分化,免疫荧光检测角膜上皮细胞标志物角蛋白12(CK12)以及角膜缘干细胞标记物ABCG2和CK19的表达.运用体外培养的方法使种植在前弹力层表面的细胞复层化.待细胞融合形成单层后,置入插入式培养皿中进行气液界面培养.培养4周后进行HE染色及免疫组织化学检测,光镜下观察其复层情况.结果 获得的hMSC可以在体外培养扩增,表现出很强的增殖潜能.流式细胞仪示:培养的hMSC CD45阳性率为0.06%,CD34为0.41%,CD44为86.43%,CD29为85.72%,CD105为90.72%.诱导4周后部分细胞表达CK12和CK19,不表达ABCG2.运用气液界面培养法进行体外复层的结果显示可以形成1～2层的上皮样细胞,并很可能为角膜上皮样细胞.结论 在本实验的诱导条件下,hMSC可以分化为上皮样细胞,并很可能为角膜上皮样细胞,hMSC有可能作为组织工程技术角膜上皮重建的种子细胞的选择.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐锦堂	暨南大学医学院眼科学研究室	142	1284	19.0	27.0
2	吴静	暨南大学医学院眼科学研究室	63	406	10.0	17.0
3	侯光辉	暨南大学医学院	19	124	6.0	10.0
4	张泽华	暨南大学医学院	2	13	1.0	2.0
5	刘小浩	暨南大学医学院	2	13	1.0	2.0
6	叶楠	暨南大学医学院	2	17	2.0	2.0
7	施文建	暨南大学医学院眼科学研究室	1	13	1.0	1.0
8	陈义	暨南大学医学院眼科学研究室	2	18	2.0	2.0