洋桔梗的转基因研究

• 作者: 王阁奇 陈丽梅 陈奇 马莉
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 洋桔梗 农杆菌介导 转基因 GFP基因
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 109-113
• 页数: 5页
• 分类号: S5
• 字数: 4723字
• 语种: 中文

摘要

以叶盘为外植体,通过农杆菌菌株C58Cl(pPMP90)介导,开展了用植物表达载体pK2-35S-GFP(含GFP基因)转化洋桔梗(Eustoma russellianum)的研究.洋桔梗叶盘用农杆菌浸染15-20 min,在共培养基上与农杆菌共培养2 d后,转移到分化培养基上诱导愈伤组织.10 d后选取部分叶盘在紫外灯下观察GFP的荧光亮点,结果80%以上的叶盘都有GFP的荧光亮点,说明农杆菌对叶盘的感染效率很高.在分化培养基上红花洋桔梗叶盘不定芽分化频率约为30%,把分化培养基上形成的小苗转移到含有Km(20 mg/L)的生根培养基上,进行生根诱导筛选具有Km抗性的转基因植株,统计结果说明红花洋桔梗的转化效率为2.4%.随机选取4株具有Km抗性的洋桔梗植株进行PCR检测,结果均为阳性,证明GFP基因已整合到洋桔梗基因组中,选取经PCR检测为阳性的植株叶片,用激光共聚焦显微镜观察,结果发现有GFP的绿色荧光出现在叶片细胞质中,说明叶片中有GFP蛋白的表达,转化试验成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈丽梅	昆明理工大学生物技术研究中心	99	642	14.0	18.0
2	马莉	昆明理工大学生物技术研究中心	6	68	4.0	6.0
3	陈奇	昆明理工大学生物技术研究中心	15	87	6.0	9.0
4	王阁奇	昆明理工大学生物技术研究中心	3	7	2.0	2.0