小麦TaPIM1基因的克隆及其转基因烟草的抗病性分析

• 作者: 刘红霞 周贤尧 张增艳 张怀渝 董娜
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 小麦 MYB转录因子 转基因烟草 青枯病抗性
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 911-917
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2010.00911

摘要

TaPIM1是从小麦中克隆获得的1个病原诱导的小麦MYB基因,编码由323个氨基酸残基组成的蛋白TaPIM1.TaPIM1具有R2R3类MYB转录因子的典型结构,即2个保守的MYB DNA结合域(R2和R3)、核定位位点和酸性激活区.TaPIM1的全长氨基酸序列与已克隆MYB蛋白的一致性仅为43.69%以下,为植物MYB转录因子家族R2R3亚群的一个新成员.小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis)、根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)侵染可快速诱导抗病小麦中TaPIM1基因的上调表达,说明TaPIM1可能参与小麦对纹枯病菌、根腐病菌的防御反应.将TaPIM1基因构建到由组成型强启动子CaMV35S控制的双子叶转化载体pBI121上,通过农杆菌介导法将其转入烟草W38品系.通过卡那霉素抗性筛选和PCR检测,鉴定出转TaPIM1基因烟草T0代株系M66、M102、M110等12个株系.对转基因烟草T1代株系进行PCR、RT-PCR分析和青枯病菌抗性分析,结果表明,TaPIM1超量表达的转基因烟草株系M66、M102和M110对青枯病菌(Ralstonia solanacearum)的抗性显著高于未转基因烟草对照,TaPIM1正向调控烟草对某些病原菌的防御反应.