阿尔茨海默病尿神经丝蛋白检测方法的建立及其临床意义

• 作者: 姬志娟 孟祥宏 张景燕 曹子青 朱建安 王培昌 王蓉 盛树力 赵志炜
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 阿尔茨海默病 尿分析 神经组织蛋白质类 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 临床实验诊断研究
• 页码范围: 46-50
• 页数: 5页
• 分类号: R74
• 字数: 3685字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2010.01.011

摘要

目的 研制检测尿中AD7C-NTP诊断试剂盒,并分析评价其在诊断AD中的临床应用价值.方法 固相法合成具有免疫原性的AD7C-NTP抗原决定簇多肽片段,通过免疫动物、制备抗体、配对筛选,以小鼠抗ADTC-NTP抗体作为包被抗体,以生物素标记兔抗AD7C-NTP抗体和辣根过氧化物酶标记亲和素建立ELISA检测尿AD7C-NTP的方法;并用以检测和分析121例AD患者与118名同龄健康人清晨中段尿液中AD7C-NTP的水平差异.结果 经过鉴定,小鼠抗AD7C-NTP抗体的ELISA检测效价为1:8 000,兔抗AD7C-NTP抗体的ELISA检测效价为1:32 000;WB检测人脑标本中抗AD7C-NTP抗体的相对分子质量为41 000.自建ELISA检测AD7C-NTP的灵敏度为0.2μg/L,线性范围为0-10μg/L,正常参考值1.5μg/L,平均回收率为100.2%,批内CV为3.8%和4.5%,批间CV为7.6%和6.8%.AD组尿AD7C-NTP[2.25(0.43-8.62)μg/L]高于健康对照组[0.82(0.47-2.77)μg/L,P<0.01],AD组和健康对照组阳性率分别为89.3%和15.3%,AD7C-NTP检测的敏感度为89.3%、特异度为84.7%.结论 用自行设计合成的多肽片段免疫动物,成功制备了抗AD7C-NTP抗体,初步建立的尿AD7C-NTP的ELISA检测方法精密度和灵敏度高,有可成为临床诊断AD的辅助手段.