EZH2基因在人卵巢癌顺铂耐药株中的表达及其对细胞耐药性的影响

• 作者: 于利利 李智敏 杨纯 王泽华 王静 胡沙 郭剑锋
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢肿瘤 RNA,小分子干扰 抗药性,肿瘤 EZH2基因
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 748-752
• 分类号: R737.31
• 字数: 3936字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2010.09.006

摘要

目的:检测果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2, EZH2)基因在人卵巢癌顺铂(cisplatin, DDP)耐药细胞株A2780/DDP及其亲本细胞株A2780中的表达差异,探讨以EZH2基因为靶向的RNA干扰能否有效逆转A2780/DDP细胞对DDP的耐药性.方法:采用实时荧光定量PCR(real-time fluorogenic quantitative PCR,RFQ-PCR)和Western印迹法检测EZH2 mRNA和蛋白在A2780/DDP及A2780细胞中的表达差异.人工构建4个靶向沉默EZH2基因的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)质粒表达载体,脂质体法瞬时转染至A2780/DDP细胞,RFQ-PCR检测EZH2基因的沉默水平并挑选沉默效果最佳的质粒载体,G418加压筛选得到转染稳定的细胞株.RFQ-PCR和Western印迹法检测稳定转染后A2780/DDP细胞中EZH2基因的表达,MTT法检测转染细胞对DDP的耐药性.结果:A2780/DDP细胞中EZH2 mRNA和蛋白的表达量分别是A2780细胞表达量的(3.50±1.06)和(2.10±0.29)倍,差异有统计学意义(P<0.01).稳定转染EZH2 shRNA后的A2780/DDP细胞,EZH2的mRNA及蛋白水平的表达量分别下降(83.66±5.65)%和(77.57±3.90)%(P<0.001),其对DDP的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值下降(61.33±11.40)%,差异有统计学意义(P<0.05). 结论:EZH2基因在A2780/DDP细胞中的表达明显升高,沉默EZH2基因能有效逆转A2780/DDP细胞对DDP的耐药性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王泽华	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	260	1294	18.0	23.0
2	王静	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	196	1363	19.0	30.0
3	李智敏	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	12	48	4.0	6.0
4	胡沙	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	25	142	8.0	10.0
5	于利利	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	28	158	8.0	11.0
6	杨纯	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	7	28	3.0	5.0
7	郭剑锋	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	4	17	3.0	4.0