共表达猪IFN-γ基因对PPV VP 2-PCV ORF2真核质粒的分子免疫佐剂效应研究

• 作者: 唐玉香 徐凯 徐志文 朱玲 郭万柱 陈燕凌
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细小病毒 VP2基因 猪圆环病毒 ORF2基因 IFN-γ基因
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 1274-1280
• 分类号: S852.659.2
• 字数: 5199字
• 语种: 中文

摘要

将干扰素-γ、猪圆环病毒Ⅱ型ORF2主要抗原表位(47-85位AA)和猪细小病毒VP2基因克隆至pCI-neo真核载体中,构建重组质粒pCI-IFN-γ.ORF2.VP2.用脂质体介导法将其转染到MDBK细胞中,利用RT-PCR和间接免疫荧光法检测产物的表达情况.将重组质粒pCI-IFN-γ.ORF2.VP2、pCI-ORF2.VP2、对照质粒pCI-neo、PBS、猪细小病毒火活苗和猪圆环病毒亚单位疫苗通过肌肉注射免疫小鼠,检测小鼠不同时期的淋巴细胞转化功能、T淋巴细胞亚群动态变化情况以及PPV、PCV2抗体水平.试验结果显示,在转染重组质粒的MDBK细胞中能扩增到ORF2-VP2和IFN-γ基因;转染后48 h用间接免疫荧光法能在荧光显微镜下观察到绿色荧光,检测到特异性蛋白的表达.pCI-IFN-γ.ORF2.VP2免疫组从第7天开始脾淋巴细胞对ConA有明显反应,显著高于对照组和PCI-ORF2.VP2免疫组;CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞的数量高于或显著高于对照组和pCI-ORF2.VP2免疫组;在免疫后第14天检测到PPV PCV抗体.结果表明,pCI-IFN-γ.ORF2.VP2能够有效诱导机体产生细胞免疫和体液免疫.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱玲	四川农业大学动物生物技术中心动物疫病与人类健康实验室	151	499	13.0	17.0
2	郭万柱	四川农业大学动物生物技术中心动物疫病与人类健康实验室	166	1465	21.0	28.0
3	徐志文	四川农业大学动物生物技术中心动物疫病与人类健康实验室	184	909	15.0	20.0
4	徐凯	四川农业大学动物生物技术中心动物疫病与人类健康实验室	7	42	3.0	6.0
5	陈燕凌	四川农业大学动物生物技术中心动物疫病与人类健康实验室	5	25	3.0	5.0