鼠OAZ1基因的真核表达质粒的构建及其在COS7细胞中的表达

• 作者: 何玲 刘梦瑶 王艳林 蔡富强 韩钰
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 医学
• 关键词: OAZ 多胺代谢 融合蛋白 真核表达
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 173-176,180
• 分类号: R3
• 字数: 3264字
• 语种: 中文

摘要

构建鼠OAZ1基因真核表达质粒,观察OAZ1-GFP融合蛋白在绿猴肾细胞COS7中的表达.利用RT-PCR的方法获得鼠OAZ1基因,再利用重叠延伸PCR缺失掉OAZ1序列中的205位碱基T,由此获得无需阅读框移码即可编码全长OAZ1的突变基因.将此突变基因克隆入真核表达载体pEGFP-N1获得重组质粒pEGFP-N1-OAZ1-T.将此质粒瞬时转染COS7后,采用RT-PCR,Western blotting,免疫荧光技术现察检测目的基因的表达情况.结果显示,酶切和测序证明质粒pEGFP-N1-OAZ1-T构建正确,转粢COS7细胞后,OAZ1-GFP融合蛋白能在细胞中高效表达.成功构建了pEGFP-N1-OAZ1-T真核表达质粒,在COS7细胞内,该质粒能成功指导OAZ1-GFP融合蛋白合成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩钰	三峡大学医学院三峡大学分子生物学研究所	71	175	7.0	9.0
2	王艳林	三峡大学医学院三峡大学分子生物学研究所	137	424	11.0	16.0
3	何玲	三峡大学医学院三峡大学分子生物学研究所	30	69	4.0	7.0
4	刘梦瑶	三峡大学医学院三峡大学分子生物学研究所	8	9	2.0	2.0
5	蔡富强	三峡大学医学院三峡大学分子生物学研究所	15	8	1.0	2.0