白喉毒素突变体CRM197在大肠杆菌中表达纯化及性质研究

• 作者: 侯登勇 孙丽霞 王庆民 王晶翼 董相陈 赵雪娜
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 医学
• 关键词: CRM197 白喉毒素 包涵体 免疫原性 急性毒性
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 153-156
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 3147字
• 语种: 中文

摘要

CRM197是一种白喉毒素突变体,作为载体蛋白广泛用于疫苗开发.将合成的CRM197基因片段克隆到表达载体pET25b中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,CRM197获得高效表达,达到菌体总蛋白的20%.目的蛋白主要以包涵体形式存在,变性、复性后经DEAE阴离子交换、S-100分子筛纯化获得纯度高于95%的CRM197样品,用该蛋白样品免疫新西兰大白兔,免疫兔血清中检测到特异性抗体应答.急性毒性试验中,每只豚鼠皮下注射200 μg CRM197纯化样品,未出现明显毒性反应症状,与之相比较,注射后48 h内,20 ng白喉毒素阳性对照组动物全部死亡.结果表明,利用本试验的表达策略,CRM197得到高效表达,并且具有良好的免疫原性和安全性,为其进一步生产及应用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙丽霞	齐鲁制药有限公司药物研究院	6	15	3.0	3.0
2	王晶翼	齐鲁制药有限公司药物研究院	14	25	4.0	4.0
3	王庆民	齐鲁制药有限公司药物研究院	7	14	3.0	3.0
4	赵雪娜	齐鲁制药有限公司药物研究院	2	5	1.0	2.0
5	董相陈	齐鲁制药有限公司药物研究院	1	4	1.0	1.0
6	侯登勇	齐鲁制药有限公司药物研究院	1	4	1.0	1.0