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摘要:
目的 通过研究细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对人角膜上皮细胞系(hunman corneal epithelial cell line,HCEC)中Toll样受体(toll-like receptors,TLR)的表达和功能的影响,以及糖皮质激素对这种影响的调控,探讨TLR及糖皮质激素在角膜细菌感染中的作用.方法 通过RT.PCR及实时PCR检测角膜上皮细胞中TLR mRNA的表达;并在细胞培养液中加入3种浓度LPS(1μg·L-1、10μg·L-1、100μg·L-1)共培养,检测TLR的表达;以及在此基础上,选择在10 μg·L-1 LPS刺激的细胞培养液中分别加入氢化可的松(1×103μg·L-1、10×103μg·L-1、100×103μg·L-1)进行干预,并检测TLR mRNA的表达;再采用酶联免疫吸附实验检测细胞培养液中IL-6、IL-8的释放;并通过免疫荧光组织化学检测TLR蛋白的表达.结果 TLR1-TLR10 mRNA在HCEC中均有表达,且表达量各不相同,其中TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、YLR6高表达.LPS能增加细胞TLR mRNA的表达,且当LPS为10μg·L-1时,TLR mRNA的表达量最高,同时IL-6、IL-8的释放也相应增加.加入氢化可的松干预后,随着激素浓度的增高,HCEC中TLR mRNA的表达也随之增加,此时IL-6的释放减少,IL-8的释放增加.免疫荧光组织化学也显示了3种浓度激素干预下HCEC的TLR2蛋白、TLR4蛋白在胞内均有表达,且强度不同,趋势与分子水平的表达一致.结论 LPS能改变角膜上皮细胞TLR mRNA的表达,提示上皮细胞表达的TLR与角膜抵御细菌的固有免疫密切相关;糖皮质激素可以调控LPS刺激的HCEC中TLR的表达,即轻度促进LPS刺激的HCEC中TLR的表达,在细菌侵袭角膜的早期,糖皮质激素可能具有一定的免疲促进作用.
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文献信息
篇名 细菌脂多糖及糖皮质激素对角膜上皮细胞Toll样受体表达的影响
来源期刊 眼科新进展 学科 医学
关键词 Toll样受体 角膜上皮细胞 细菌脂多糖 糖皮质激素 细胞因子
年,卷(期) 2010,(7) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 637-643
页数 7页 分类号 R772
字数 6418字 语种 中文
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1 瞿佳 214 2120 21.0 36.0
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糖皮质激素
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