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白桦cDNA-AFLP体系的优化和建立
白桦cDNA-AFLP体系的优化和建立
作者:
刘雪梅
宋福南
邢磊
原文服务方:
东北林业大学学报
白桦
cDNA-AFLP
优化
摘要:
为了建立适合白桦的cDNA-AFLP体系,对反应体系中的酶切、预扩增、选择性扩增的引物筛选等几个重要的影响因素进行优化,得到了适合白桦的cDNA-AFLP反应体系.选择白桦雄花为研究材料,用改良的CTAB法提取总RNA,采用低频酶EcoR Ⅰ和高频酶Mse Ⅰ酶切双链cDNA.通过研究发现,预扩增中Mg2+浓度为2mmol/L,引物浓度为0.3 μmol/L,dNTP浓度为0.25 mmoL/L,Taq酶浓度为1 U,退火温度控制在60℃时,预扩增结果较好.另外,从16对引物组合中选出11对选择性较好的引物组合,扩增的产物经过6%的聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳和银染检测,得到清晰、分辨率高、信号强度明显且重复性好的结果,表明该cDNA-AFLP分析体系适用于白桦相关的功能基因的研究.
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篇名
白桦cDNA-AFLP体系的优化和建立
来源期刊
东北林业大学学报
学科
关键词
白桦
cDNA-AFLP
优化
年,卷(期)
2010,(10)
所属期刊栏目
研究方向
页码范围
15-18
页数
分类号
Q781
字数
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1000-5382.2010.10.006
五维指标
作者信息
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姓名
单位
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1
宋福南
10
223
7.0
10.0
2
刘雪梅
31
392
12.0
19.0
3
邢磊
4
26
3.0
4.0
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版权信息
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节点文献
白桦
cDNA-AFLP
优化
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
东北林业大学学报
主办单位:
东北林业大学
出版周期:
月刊
ISSN:
1000-5382
CN:
23-1268/S
开本:
大16开
出版地:
邮发代号:
创刊时间:
1957-01-01
语种:
chi
出版文献量(篇)
7235
总下载数(次)
0
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