RNAi抑制肾癌细胞MDR1基因表达及对顺铂化疗耐药的逆转

• 作者: 杜楠 沈茜 肖文华 贺铮雯 郝怡鑫 鲁琼
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 肾肿瘤 RNA,小分子干扰 基因,MDR 顺铂 A498细胞
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 115-118
• 页数: 4页
• 分类号: R737.11
• 字数: 3939字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2010.02.006

摘要

目的:研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)对肾癌细胞多药耐药基因1(multidrug resistance,MDR1)表达的抑制作用,并分析干扰前后肾癌细胞对顺铂(cisplatin)敏感度的变化.方法:根据MDR1基因序列设计3条小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染肾癌A498细胞;RT-PCR法检测转染前后MDR1 mRNA表达水平的变化,筛选出干扰效率最高的siRNA序列;进而利用慢病毒包装siRNA重组质粒,感染A498细胞,RT-PCR法筛选沉默效果最好的细胞株进行克隆;Western印迹法检测MDR1蛋白表达水平;MTT法检测干扰前后顺铂对半数细胞抑制浓度(half inhibitory concentration,IC_(50))的变化.结果:3条siRNA序列均能不同程度地抑制细胞MDR1基因的表达,其中siRNA-1序列能更有效地封闭MDR1基因,使MDR1 mRNA表达水平下降67%;筛选得到稳定转染的细胞株与未干扰细胞株相比,MDR1蛋白表达量明显下降(P<0.01),并使顺铂对细胞的IC_(50)值降低约83.37%(P<0.01).结论:RNAi能有效抑制肾癌A498细胞MDR1基因的表达,并可显著增加其对顺铂的敏感度,从而使肾癌细胞化疗耐药逆转成为可能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈茜	第二军医大学附属长海医院实验诊断科	184	1189	17.0	25.0
2	郝怡鑫	第二军医大学附属长海医院实验诊断科	9	60	4.0	7.0
4	肖文华	解放军总医院第一附属医院肿瘤科	58	274	9.0	15.0
5	杜楠	解放军总医院第一附属医院肿瘤科	45	188	8.0	11.0
8	贺铮雯	第二军医大学附属长海医院实验诊断科	5	48	3.0	5.0
9	鲁琼	第二军医大学附属长海医院实验诊断科	4	43	3.0	4.0