脱毛碱性蛋白酶定点突变的初步分析

• 作者: 冯红 张义正 张小伟 杨庆军
• 来源期刊: 四川大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 脱毛蛋白酶 温度适应性 定点突变 枯草芽孢杆菌
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 936-940
• 分类号: Q816
• 字数: 3332字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0490-6756.2010.04.048

摘要

来自于Bacillus pumilus菌株BA06的碱性蛋白酶DHAP具有良好的脱毛能力.为了更好地了解DHAP的催化特性和进一步改造使之更加符合制革工艺的要求,根据蛋白质同源建模和嗜冷嗜热酶氨基酸组成的统计分析结果,确定了13个氨基酸位点进行定点突变.通过牛奶平板和对粗酶液在不同温度和热稳定性方面的活性进行了分析.结果发现位于DHAP空间结构上底物结合"口袋"开口处α-螺旋上的氨基酸残基(E220,V223和K244)严重影响酶的活性;位于底物结合口袋袋底的三个保守位点V256L、V257I和V258I在常温(28℃)下保留了较高的活性,同时也影响热稳定性;靠近活性位点D140的V201Y突变体可能直接通过与D140的相互作用,导致活性急剧下降.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张义正	四川大学生命科学学院四川省分子生物学与生物技术重点实验室	150	2059	26.0	38.0
2	冯红	四川大学生命科学学院四川省分子生物学与生物技术重点实验室	8	19	3.0	4.0
3	杨庆军	四川大学生命科学学院四川省分子生物学与生物技术重点实验室	1	4	1.0	1.0
4	张小伟	四川大学生命科学学院四川省分子生物学与生物技术重点实验室	3	26	3.0	3.0