一种从石蜡包埋组织中快速提取DNA的方法

• 作者: 任辉 张惠丹 方瑾 王晓楠
• 来源期刊: 临床与实验病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 甲醛固定 石蜡包埋组织 DNA提取 聚合酶链式反应(PCR)
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 590-593
• 分类号: R446.8|R394.2
• 字数: 3535字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7399.2010.05.020

摘要

目的 建立从甲醛固定石蜡包埋组织中高效、快速提取基因组DNA的方法.方法 将一片10 μm厚石蜡包埋大肠癌组织切片直接浸入150 μl消化液中,56 ℃孵育0.5 h、1 h和2 h,灭活蛋白酶K后离心取上清即为DNA提取物.琼脂糖凝胶电泳检测所提取DNA的片段分布,紫外分光光度法测定DNA的产量及纯度.以提取的DNA为模板,PCR扩增不同长度产物片段并进行产物的直接测序以评价提取方法.结果 该提取方法能够获得较长片段的基因组DNA,从一片10 μm厚石蜡切片中即可获得大约60 μg的DNA,在0.5 h消化条件下获取的模板DNA,即可实现对152 bp、293 bp、392 bp和541 bp等4种不同片段的100%扩增,1 h消化组的PCR产物可直接用于DNA测序.结论 建立了一种简单、快速地从甲醛固定石蜡包埋组织中提取DNA的方法,只需一步消化即可获得满足普通PCR及测序需要的基因组DNA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任辉	沈阳市肛肠医院大肠外科	7	11	2.0	3.0