鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白基因的筛选及其对转移性前列腺癌细胞生物学行为的影响

• 作者: 于文娟 崔湘琳 王曰伟 王洁良 由江峰 裴斐 谢志刚 郑杰
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺肿瘤 肿瘤转移 肿瘤标记 生物学 寡核苷酸序列分析
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 实验病理学
• 页码范围: 88-94
• 页数: 7页
• 分类号: R73
• 字数: 6188字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-5807.2010.02.005

摘要

目的 筛选肿瘤转移相关新基因,探讨鞘精脂微结构域1相关磷酸化蛋白基因(PAG1)转染对人前列腺癌细胞系PC-3M的高转移亚系PC-3M-1E8体外生物学行为的影响.方法 利用PC-3M高转移亚系PC-3M-1E8、低转移亚系PC-3M-284,人肺巨细胞痛细胞系(PG)高转移亚系PG-BE1和低转移亚系PG-LH7 cDNA制作4张基因芯片,筛选出PC-3M和PG高、低转移亚系共同差异表达基因.对在两个转移亚系共同表达下调的PAG1基因做进一步研究,采用即时定量PCR及Western blot验证PAG1在PC-3M细胞系中的表达.构建pcDNA3.0-PAG1真核表达载体,稳定转染PC-3M-1E8细胞.MTT比色实验及软琼脂集落形成实验检测肿瘤细胞体外增殖能力;流式细胞术检测肿瘤细胞周期及凋亡;Matrigel穿膜实验检测肿瘤细胞体外侵袭能力.结果 基因芯片初步筛选出PC-3M高、低转移亚系差异表达基因共327个,上调基因123个,下调基因204个.PG高、低转移亚系差异表达基因共281个,上调基因167个,下调基因114个.PC-3M与PG高转移亚系共同表达下调基因9个、上调基因8个.即时定量PCR及Western blot证实PAG1在PC-3M高转移亚系中表达低于低转移亚系.MTT比色及软琼脂集落形成实验显示转染pcDNA3.0-PAG1组细胞增殖速度明显低于转染空载体组和未转染组(均P<0.05).细胞周期检测转染pcDNA3.0-PAG1组比转染空载体组和未转染组处于G_0～G_1期的细胞百分数明显增加(P<0.05).转染pcDNA3.0-PAG1组与转染空载体组和未转染组相比凋亡细胞百分率无显著差异(P>0.05).体外穿膜侵袭实验结果表明转染pcDNA3.0-PAG1组比转染空载体组和未转染组穿膜细胞数目明显减少,分别为(35.1±4.9)、(127.6±6.6)和(135.0±5.0)个(P<0.05).结论 利用同一母系来源的高、低转移亚系制作基因芯片可以摒除转移无关基因的干扰,筛选出差异表达的肿瘤转移相关基因.PAG1基因稳定转染能抑制人前列腺癌高转移亚系PC-3M-1E8细胞的体外增殖能力和侵袭能力,PAG1基因可能是一个潜在的肿瘤增殖、侵袭和转移的抑制基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑杰	北京大学医学部病理学系	95	839	16.0	22.0
2	裴斐	北京大学医学部病理学系	46	443	11.0	20.0
3	由江峰	北京大学医学部病理学系	42	372	11.0	16.0
4	王曰伟	青岛大学医学院附属医院血管外科	23	65	5.0	7.0
5	于文娟	北京大学医学部病理学系	3	11	2.0	3.0
6	王洁良	北京大学医学部病理学系	14	173	7.0	13.0
7	崔湘琳	北京大学医学部病理学系	12	168	7.0	12.0
8	谢志刚	北京大学医学部病理学系	9	45	4.0	6.0