斜纹夜蛾核型多角体病毒ⅡORF59基因克隆及原核表达

• 作者: 朱江 王文兵 盛晔 石瑞英 金玉婷
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 斜纹夜蛾 核型多角体病毒 ORF59基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 37-40
• 分类号: Q969.436.4
• 字数: 4798字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-1302.2010.05.012

摘要

斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ(Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus,SpltMNPVⅡ)是一种新发现的繁殖率和毒力极强的病毒株,其全基因组序列已经测定,共149个ORFs.对SpltMNPVⅡ BV和ODV的质谱分析表明,ORF59位于ODV中,是一个功能未知的ORF.本研究根据SpltMNPVⅡ ORF59基因序列设计引物,经PCR扩增,克隆了ORF59基因.核苷酸序列分析表明,克隆片段上游具有4个TATA box,一个早期启动子CAGT和一个晚期启动子ATAAG.读码框含645 bp,编码214个氨基酸的蛋白质,推定分子量为25.4 ku.将ORF59片段克隆至原核表达载体pET-28a(+),经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中融合表达,SDS-PAGE分析表明在约29 ku处有特异性表达条带,经Western blot验证该蛋白即为融合表达的目的蛋白.融合表达产物经纯化后,免疫新西兰大白兔获得ORF59多克隆抗体.上述结果为深入研究ORF59的结构与功能提供基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱江	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院	114	733	13.0	22.0
2	王文兵	江苏大学生命科学学院	108	565	12.0	19.0
3	盛晔	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院	9	47	4.0	6.0
4	石瑞英	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院	3	4	1.0	1.0
5	金玉婷	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院	3	4	1.0	1.0