美洲黑杨木质素合成关键基因的克隆及反义表达载体的构建

• 作者: 张中伟 徐飞 曹阳 林宏辉 薛立薇 袁澍
• 来源期刊: 中南林业科技大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 生物科学与技术 美洲黑杨 木质素合成 关键基因 克隆技术 反义表达载体
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 77-82
• 分类号: S722.5
• 字数: 3350字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-923X.2010.11.016

摘要

以美洲黑杨Populus deltoides新萌叶片为材料,通过自行设计引物,用RT-PCR的方法克隆了美洲黑杨木质素合成关键基因4CL和CAD基因部分序列.测序结果表明:这两个基因片段长度分别为859 bp和493 bp.此外,人工合成了4CL基因木质部特异表达启动子4CLp,长度为1 180 bp.分别用限制性内切酶Hind Ⅲ/BamH Ⅰ、BamH Ⅰ/Sma Ⅰ和Sma Ⅰ/Sac Ⅰ对4CLp、4CL和CAD基因序列进行双酶切,同时用Hind Ⅲ/Sac Ⅰ对pBI121表达载体进行双酶切,回收了目的片段.酶切回收后用T4DNA连接酶克隆到植物表达载体pBI121中,并转化至大肠杆菌感受态细胞DH5α.经质粒PCR和双酶切分析,确定获得了pBI-4CLp-a4CL-aCAD反义植物表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林宏辉	四川大学生命科学学院	88	991	17.0	29.0
2	袁澍	四川大学生命科学学院	19	431	7.0	19.0
3	张中伟	四川大学生命科学学院	36	151	6.0	11.0
4	徐飞	四川大学生命科学学院	22	117	3.0	10.0
5	曹阳	四川大学生命科学学院	12	87	5.0	9.0
6	薛立薇	四川大学生命科学学院	1	3	1.0	1.0