红豆草ISSR体系优化及其在航天诱变种质鉴定中的应用

• 作者: 康俊梅 张蕴薇 沈紫微 陈本建 魏小兰
• 来源期刊: 草业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 红豆草 ISSR标记 体系优化 引物筛选 航天诱变
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 65-72
• 分类号: S541+.403|Q943
• 字数: 5437字
• 语种: 中文

摘要

采用正交设计法优化适合于红豆草(Onobrychis viciaefolia)的ISSR体系,对影响ISSR-PCR的多个因素,包括dNTP、引物浓度、Taq酶浓度、Mg2+浓度进行了4因素3水平的比较、优化,建立了红豆草的ISSR最佳反应体系.运用该体系进行引物及最佳退火温度的筛选,并应用ISSR分子标记技术初步分析红豆草航天搭载诱变效应.结果表明,红豆草ISSR-PCR最佳反应体系为:2.5μL 10×PCR buffer、50 ng模板DNA、dNTP 0.2 mmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U、引物0.4μmol/L、Mg2+ 2.0 mmol/L,总体积为25 μL.试验从53个ISSR引物中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的12个引物,并依次筛选出各引物的退火温度.12个引物标记结果显示共获得多态性位点142个,多态性比率为73.6%.地面对照的多态位点比率(P)、Nei基因多样度(h)和Shannon多样性指数(I)均低于航天诱变种,太空环境能够诱导红豆草发生基因变异.航天诱变可作为红豆草种质资源创新和品种选育的方法之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈本建	甘肃农业大学草业学院	43	497	12.0	20.0
2	张蕴薇	中国农业大学动物科技学院	74	1389	22.0	34.0
3	康俊梅	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	81	1022	17.0	29.0
4	沈紫微	甘肃农业大学草业学院	1	13	1.0	1.0
5	魏小兰	中国农业大学动物科技学院	3	21	2.0	3.0