整合素β1表达下调对非小细胞肺癌细胞迁移和黏附能力的影响

• 作者: 周彩存 鞠立霞
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 癌,非小细胞肺 RNA干扰 整合素类 基因表达 细胞运动
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 188-193
• 页数: 6页
• 分类号: R734.2
• 字数: 5127字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2010.03.004

摘要

目的:构建整合素β1基因特异的RNA干扰质粒,探讨抑制整合素β1蛋白表达对非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)细胞生物学行为的影响.方法:根据GenBank数据库提供的整合素β1基因核苷酸序列,选择设计1条能转录短发夹RNA (small hairpin RNA,shRNA)的DNA序列,命名为17-2;同时设计1条非特异性序列作为阴性对照,命名为N.将设计序列与pUC19质粒载体连接,转化感受态大肠埃希菌,挑选阳性克隆,抽取重组质粒.2种重组质粒分别转染NSCLC耐药细胞株PC-9/AB2细胞,用G418筛选后挑选单克隆并扩增获得稳定转染株.荧光显微镜、实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,RFQ-PCR)和Western印迹法检测整合素β1 mRNA及蛋白表达水平.细胞划痕实验和黏附实验比较整合素β1对细胞迁移和黏附能力的影响.结果:G418筛选出稳定转染2种质粒的PC-9/AB2细胞,荧光显微镜下可见满视野带绿色荧光的细胞,转染17-2组细胞中整合素β1的mRNA及蛋白表达水平明显低于转染N组细胞及母细胞PC-9/AB2.划痕实验和黏附实验表明,整合素β1抑制可以使细胞迁移和黏附能力明显降低.结论:成功构建针对整合素β1基因的特异性shRNA真核表达载体,转染NSCLC细胞后可抑制整合素β1蛋白表达.整合素β1表达抑制后细胞迁移和黏附能力明显降低.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周彩存	同济大学附属上海市肺科医院肿瘤科	125	761	15.0	21.0
2	鞠立霞	同济大学附属上海市肺科医院肿瘤科	8	24	3.0	4.0