双启动子shRNA真核表达载体的构建

• 作者: 娜仁 张瑞 杨宇虹 梁东春 汪蓓蕾 赵郁 郭刚
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 启动区(遗传学) 遗传载体 RNA,小分子干扰 聚合酶链反应 重组,遗传 质粒
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 840-842
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2010.10.003

摘要

目的:构建含有双启动子的shRNA真核表达载体.方法:通过PCR分别扩增带有BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/E)和带有Bgl Ⅱ、HindⅢ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/H),用BamH Ⅰ与EcoRⅠ双酶切pcDNA3.1(+)与PCR产物U6-B/E后进行连接,重组质粒命名为psPRO.再用BglⅡ与HindⅢ双酶切psPRO与PCR产物U6-B/H后进行连接,构建含有双启动子的shRNA真核表达载体.结果:酶切鉴定以及DNA测序结果显示载体构建成功.结论:构建双启动子的shRNA真核表达载体,使其在细胞中表达2个不同的siRNA,不仅筛选方便,而且可以通过建立这种模式化工具载体,为今后RNA干扰实验研究的开展和深入提供手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵郁	天津医科大学生化教研室	17	85	5.0	8.0
2	郭刚	卫生部激素与发育重点实验室天津医科大学代谢病医院内分泌研究所	2	22	2.0	2.0
3	娜仁	卫生部激素与发育重点实验室天津医科大学代谢病医院内分泌研究所	1	2	1.0	1.0
4	张瑞	卫生部激素与发育重点实验室天津医科大学代谢病医院内分泌研究所	1	2	1.0	1.0
5	汪蓓蕾	卫生部激素与发育重点实验室天津医科大学代谢病医院内分泌研究所	1	2	1.0	1.0
6	梁东春	卫生部激素与发育重点实验室天津医科大学代谢病医院内分泌研究所	1	2	1.0	1.0