兔支气管败血波氏杆菌双夹心ELISA检测方法的建立

• 作者: 恽时锋 林焱 熊富强 王芳 胡波 范志宇 赵宁
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 支气管败血波氏杆菌 免疫血清 单克隆抗体 双夹心ELISA
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 120-125
• 页数: 6页
• 分类号: S858.291
• 字数: 4526字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2010.01.023

摘要

为建立特异性好、敏感性高、稳定可靠的兔支气管败血波氏杆菌(Bb)双夹心ELISA检测方法,制备了兔抗Bb免疫血清和小鼠抗Bb腹水单抗(Bb McAb),并将它们提纯.用方阵法筛选最佳反应浓度,用特异性试验、敏感性试验和重复性试验对该方法进行鉴定,并与PCR检测方法比较.结果表明,兔抗Bb IgG的最佳稀释度为1:6.400,浓度为2.5 mg/L;单抗的最佳稀释度为1:800,浓度为 5.0 mg/L.特异性试验和重复性试验结果表明,该方法特异性强、重复性好,与兔常见病菌大肠埃希氏菌、多杀性巴氏杆菌和产气荚膜梭菌均不发生反应,同时与PCR检测方法的符合率为100%.