鸡细胞因子实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 丛秋霞 方强 潘志明 焦新安 耿士忠
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 实时荧光定量聚合酶链反应 细胞因子 定量检测
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 1265-1270
• 页数: 6页
• 分类号: Q511|Q503
• 语种: 中文

摘要

根据鸡IL-6、IL-1β、IFN-γ、TGF-β4 mRNA的保守序列设计特异性引物,提取经鞭毛蛋白刺激的鸡巨噬细胞HD11总RNA,并反转录成cDNA,建立了实时荧光定量PCR方法.结果显示,融解曲线均呈单一峰;同一份cDNA经过3个相同反应体系的实时荧光定量PCR扩增后,其扩增曲线基本重合.HD11细胞经鞭毛蛋白刺激后,前炎性细胞因子IL-6和IL-1β的相对表达量分别为14.90和29.09,与对照组相比显著升高(P＜0.05);而IFN-γ与抗炎性细胞因子TGF-β4的相对表达量无显著变化(P＞0.05).应用该方法检测了3份沙门菌感染鸡血液样品异嗜白细胞中这4种细胞因子的表达水平,前炎性细胞因子IL-6、IL-1β的相对表达量分别为6.19和2.39,与对照组相比显著升高(P＜0.05);TGF-β4的相对表达量无明显变化(P＞0.05).结果表明,建立的实时荧光定量PCR方法特异性强、重复性好,为定量检测鸡细胞因子的一种快速、准确的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	焦新安		249	2602	25.0	38.0
2	潘志明		163	1328	20.0	28.0
3	耿士忠		38	211	9.0	13.0
4	方强		6	29	3.0	5.0
5	丛秋霞		3	44	2.0	3.0