大鼠STAT3基因靶向shRNA真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 丁晓然 周伟 周喆 周焕芝 张五星 张智敏 石炳毅 赵学伟
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 生物学
• 关键词: 信号转导子及转录激活子3 短发夹RNA 质粒 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2010,（17）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 13-15
• 分类号: Q344+.13
• 字数: 2688字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2010.17.006

摘要

目的 针对大鼠信号转导子及转录激活子3(STAT3)基因序列,构建特异性短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体.方法 根据STAT3基因序列及shRNA设计原则,设计4条干扰效果最佳的shRNA,化学合成4对引物,通过PCR扩增获得dsDNA模板,采用DNA重组技术与pGCsi-U6/Hygro/GFP空载体连接,转化DH5a感受态细胞经诱导表达筛选阳性克隆子,抽提重组质粒,进行DNA测序鉴定.结果 转化大肠杆菌涂布平板长出阳性菌落,测序结果与所设计的STAT3 shRNA转录模板序列一致.结论 所设计的shRNA编码序列被正确地插入到质粒骨架中,成功构建了STAT3基因的shRNA表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	石炳毅	解放军第309医院全军移植中心	153	601	11.0	14.0
2	张智敏	解放军第309医院全军移植中心	15	49	4.0	6.0
3	赵学伟	解放军第309医院全军移植中心	16	38	4.0	5.0
4	周喆	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	25	125	7.0	9.0
5	周伟	解放军第309医院全军移植中心	38	140	7.0	10.0
6	周焕芝	解放军第309医院全军移植中心	5	16	2.0	4.0
7	张五星	解放军第309医院全军移植中心	17	75	5.0	8.0
8	丁晓然	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	7	26	3.0	4.0