烟草花叶病毒南瓜分离物CP基因的克隆、序列分析及其原核表达

• 作者: 刘金亮 张世宏 潘洪玉 王凤婷 魏毅
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 南瓜 烟草花叶病毒 CP基因 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 6-10
• 分类号: Q78|S642.4|S432.4+1
• 字数: 3614字
• 语种: 中文

摘要

为从分子水平鉴定山东聊城的一表现明显花叶、黄化、蕨叶及果实畸形的南瓜病毒病的病原.采用RT-PCR的方法,用TMV外壳蛋白(CP)基因的特异引物,对该样品进行了检测,克隆到的基因序列进行分析,并使其在大肠杆菌中表达.结果表明,从该样品中扩增到了TMV的CP基因,说明该样品受到TMV的侵染,首次发现TMV自然侵染南瓜.对CP基因序列测定及分析表明,与GenBank上其他TMV分离物CP基因核苷酸序列的同源性为86.5%～99.0%,推导的氨基酸序列同源性为93.7%～99.4%.根据完整CP 基因核苷酸序列构建的系统进化树显示:32个TMV分离物可分为5个组,其中TMV-liaocheng与Nakron Pathom、Fujian、017等分离物属于Ⅳ组.TMV-liaocheng可能发生过重组.将TMV-liaocheng CP基因与原核表达载体pET-22b(+)连接,在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS诱导表达出分子量约20 kDa的融合蛋白,并用Ni2+ -NTA His · Bind(R)树脂纯化,纯化后的蛋白可直接用于制备特异性的抗血清,为准确、快速地检测TMV奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘金亮	吉林大学植物科学学院	33	205	8.0	13.0
2	魏毅	吉林大学植物科学学院	9	41	4.0	6.0
3	潘洪玉	吉林大学植物科学学院	55	329	9.0	16.0
4	张世宏	吉林大学植物科学学院	15	95	6.0	9.0
5	王凤婷	吉林大学植物科学学院	6	36	3.0	6.0