刚地弓形虫RH株速殖子对小鼠结肠癌细胞ct26体外增殖和细胞周期的影响

• 作者: 叶彬 孔璟 武卫华 高剑
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 刚地弓形虫 小鼠结肠癌ct26细胞 周期阻滞 细胞周期蛋白
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 1088-1092
• 分类号: R382.5
• 字数: 4801字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.12.002

摘要

目的 研究刚地弓形虫RH株速殖子对小鼠结肠癌ct26细胞体外增殖和细胞周期的影响,并探讨其作用的分子机制.方法 取对数生长期的小鼠结肠癌ct26细胞,建立弓形虫与ct26复合感染度(moi)分别为 1∶1、2∶1、4∶1、8∶1、16∶1的共培养试验模型,台盼兰排斥试验连续7 d绘制细胞生长曲线;流式细胞仪检测8∶1共培养模型组6 h、12 h、24 h、48 h细胞周期改变;采用半定量RT-PCR方法分别检测ct26细胞cyclinB1、cdc2 基因转录水平变化;Western blot 方法检测细胞周期蛋白cyclinB1蛋白水平变化.结果 台盼兰排斥试验发现各比例组弓形虫均能有效抑制小鼠ct26细胞的体外增殖,且呈现前4 d缓慢抑制,4 d后细胞大量死亡的现象,以8∶1模型组的增殖抑制作用最明显,感染7 d后细胞抑制率达80.77%(P<0.01);流式细胞仪检测发现8∶1模型组弓形虫可在各作用时间明显改变ct26细胞周期分布,使G0/G1期细胞百分比下降,G2/M期百分比显著升高(P<0.01),24 h达到作用高峰,使G2/M期百分比升高12.77%,48 h则细胞G2/M期百分比下降;弓形虫感染ct26细胞3～24 h,细胞cdc2转录水平在各个时间点未见明显变化,细胞cyclinB1从转录水平和蛋白水平均呈现为感染3 h时表达增强,随后各时间点均明显降低的现象,cyclinB1基因转录水平在感染后24 h只达到对照组的16.55%.结论 弓形虫RH株速殖子可明显抑制小鼠结肠癌ct26细胞体外增殖,感染前期以诱导细胞发生G2/M期阻滞为主要机制,细胞周期蛋白cyclinB1活性下降在G2/M期阻滞中起主要作用.