ADMA对内皮生长晕细胞凋亡及其相关p38丝裂素活化蛋白激酶表达的影响

• 作者: 叶盛 夏雪 张怀勤 林以诺 贾红梅 邵小琳 黄伟剑
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 精氨酸 内皮生长晕细胞 细胞凋亡 p38MAPK
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1052-1058
• 分类号: R363
• 字数: 5229字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2010.06.003

摘要

目的:探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对内皮生长晕细胞(EOCs)凋亡和黏附能力的影响以及凋亡相关p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)表达水平的变化.方法:分离脐血中单个核细胞并原代培养扩增内皮生长晕细胞,免疫细胞化学染色和荧光染色法鉴定其内皮细胞特性.将浓度为0、1、5、10、30 μmol/L ADMA与内皮生长晕细胞作用48 h,流式细胞仪检测细胞凋亡率,DAPI染色及AnnexinV/PI双染观察凋亡细胞核形态变化.在倒置显微镜下观察计数重黏附细胞数来测定细胞黏附能力.用特异性的 phospho-p38MAPK抗体的Western blotting检测p38MAPK的活性.结果:采用贴壁法培养的细胞具有多种内皮细胞特性.ADMA(1-30 μmol/L)诱导内皮生长晕细胞的凋亡(P<0.01),同时ADMA(5-30 μmol/L)使phospho-p38MAPK蛋白表达增加,两者作用均呈浓度依赖性.ADMA作用组和对照组相比,激光共聚焦显微镜下可见更显著的细胞凋亡形态学改变.除1 μmol/L ADMA外,5、10、30 μmol/L ADMA均可抑制内皮生长晕细胞的黏附能力.结论:ADMA能诱导内皮生长晕细胞发生凋亡并抑制其黏附能力,ADMA诱导内皮生长晕细胞发生凋亡可能与p38 MAPK磷酸化水平上升有关.