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摘要:
目的 利用新型诱导剂钙离子载体(CI)A23187联合重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)体外诱导人外周血单核细胞(PBMC)生成树突细胞(DC),观察DC刺激细胞毒性T细胞(CTL)对人白血病细胞K562细胞产生的特异性杀伤作用.方法 采用密度梯度离心法及黏附法分离出PBMC,分2组培养:传统方法组,加人rhGM-CSF+重组人白细胞介素4+重组人肿瘤坏死因子-α;新型诱导剂组,加入rhGM-CSF+CI A23187.培养开始前,予K562细胞冻融抗原致敏,培养96 h后收集负载抗原的DC.光镜观察细胞形态的变化;流式细胞仪检测DC细胞的表面标志;四甲基偶氮唑盐比色法检测各组DC刺激同种异体外周血T细胞增殖的能力、DC对K562细胞的抑制作用和DC激活的CTL细胞对K562细胞的杀伤作用.结果 与传统方法相比,A23187联合rhGM-CSF 诱导培养的DC具有更加典型的树突形态;DC 表面分子CD83、CD1a、CD86、CD40表达(45.2%±1.8%、31.5%±3.9%、40.1%±7.8%、36.4%±6.3%)较传统方法组(16.9%±1.3%、20.4%±3.4%、26.5%±2.2%、22.3%±3.0%)明显高(均P<0.05),且CD14表达(5.7%±0.8%比19.0%±1.6%)明显低(P<0.05);负载K562细胞冻融抗原后的DC具有明显刺激同种异体T细胞增殖作用;对K562细胞有明显抑制作用,效靶比为1:1及10:1时,抑瘤率分别为(25.3±3.8)%比(15.6±2.4)%、(35.6±5.2)%比(22.9±3.2)%(均P<0.05);刺激的CTL对K562细胞有明显的杀伤作用,效靶比为10:1及40:1时,杀瘤率分别为(44.3±6.2)%比(29.9±2.8)%、(61.0±5.2)%比(43.1±4.8)%(均P<0.05).结论 新型诱导剂CI A23187联合rhGM-CSF能更有效地诱导PBMC生成强效成熟DC,K562细胞冻融抗原冲击该DC激活CTL能够获得较强的杀伤K562细胞的能力.
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文献信息
篇名 抗原致敏树突细胞激活细胞毒性T淋巴细胞的体外抗肿瘤作用
来源期刊 中华医学杂志 学科 医学
关键词 离子载体 细胞因子类 树突细胞 T淋巴细胞,细胞毒性 K562细胞
年,卷(期) 2010,(26) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 1849-1853
页数 分类号 R73
字数 3958字 语种 中文
DOI 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2010.26.015
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 沙卫红 广东省人民医院消化内科 37 242 10.0 14.0
2 李瑜元 广州医学院附属广州市第一人民医院消化内科广州市消化病重点实验室 81 631 14.0 21.0
3 聂玉强 广州医学院附属广州市第一人民医院消化内科广州市消化病重点实验室 73 563 13.0 19.0
4 彭卫斌 广州医学院附属广州市第一人民医院消化内科广州市消化病重点实验室 2 5 1.0 2.0
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2-588
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