大鼠骨髓间充质干细胞体外生长增殖特点的实验研究

• 作者: 刘君静 孙辽 尹代婵 庞天娇 朱丹华 舒晓春 鲁红云
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 间质干细胞 细胞培养技术 评价研究
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 923-927
• 分类号: R1
• 字数: 4781字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2010.10.017

摘要

目的 了解应用全骨髓贴壁法分离的大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的生长、增殖特点,以及接种密度、培养时间对细胞增殖的影响,为预防和治疗机体退行性疾病等提供多潜能的种子细胞.方法 通过全骨髓贴壁法分离SD大鼠BMSCs,在体外条件下培养,应用倒置显微镜观察细胞形态学特征及流式细胞仪鉴定、检测大鼠BMSCs表面标志抗原,并通过分析对接种于96孔板不同接种密度(2×103、5×103、1×104个细胞/ml)连续培养10 d细胞生长曲线的特点,研究接种密度和培养时间对BMSCs生长、增殖的影响.结果 流式细胞仪分析CD29细胞阳性率为97.68%(7607/7788),CD34、CD45细胞阳性率分别为7.93%(661/8340)、2.76%(215/7788),符合BMSCs表面标记物表达特征.通过换液及消化传代,3代以上的BMSCs较为均一纯化,呈典型的旋涡或放射状生长,约传代至7～10代时出现细胞衰老并衰老细胞逐渐增多;中等密度(5×103个细胞/ml)接种细胞的生长曲线呈较典型的S形曲线.第1、2天为潜伏期;第3～5天为对数生长期;第6天细胞数目进入平台期;第8～10天细胞数量稍有下降.结论 全骨髓贴壁法是获得BMSCs较为简便有效的方法,且中等量接种密度更有利于细胞增殖,可获得更多的种子细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	舒晓春	中山大学附属第五医院内分泌科	83	657	14.0	21.0
2	朱丹华	中山大学附属第五医院内分泌科	11	114	6.0	10.0
3	孙辽	中山大学附属第五医院内分泌科	53	267	9.0	13.0
4	尹代婵	中山大学附属第五医院内分泌科	8	38	3.0	6.0
5	鲁红云	中山大学附属第五医院内分泌科	42	187	7.0	10.0
6	刘君静	成都军区总医院内分泌科	8	93	5.0	8.0
7	庞天娇	中山大学附属第五医院内分泌科	3	26	2.0	3.0