重组外源性人热休克蛋白70基因真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 万小平 张阳德 陈玉祥 韩世伟
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 热休克蛋白70 真核表达载体 基因载体 基因重组 基因治疗
• 年，卷（期）: 2010,（20）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 3674-3677
• 分类号: R318
• 字数: 4921字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.20.015

摘要

背景:热休克蛋白70的肿瘤免疫作用近年来受到国内外学者的广泛关注,然而目前常用的诱导内源性热休克蛋白70表达的方法,如热应激、缺血预处理等均存在一些弊端.目的:拟构建携带并正确表达外源性人热休克蛋白70基因的重组真核表达载体.方法:外源性热休克蛋白70基因连接入真核表达载体pDC315-EGFP中,转化大肠杆菌感受态细胞,重组真核表达载体外源基因测序及PCR检测鉴定阳性克隆后转染人胚肾293细胞,荧光显微镜及western blot鉴定外源基因在细胞中的表达.结果与结论;经PCR和测序证实外源性人热休克蛋白70基因正确重组入真核表达载体pDC315-EGFP,转染293细胞后荧光显微镜观察到绿色荧光蛋白GFP的表达,Western blot检测到热休克蛋白70在293细胞中有效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张阳德	中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心	556	4187	26.0	40.0
5	万小平	中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心	27	372	11.0	19.0
6	陈玉祥	中南大学卫生部纳米生物技术重点实验室	42	350	8.0	17.0
7	韩世伟	中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心	2	4	2.0	2.0