J亚群禽白血病毒gp85基因克隆表达与初步应用

• 作者: 余多 孙淼 李金彩 王李梁 陈福勇
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 禽白血病 禽白血病病毒 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 6-9
• 分类号: S852.65+9.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-6005.2010.04.002

摘要

在本实验室分离鉴定J亚群禽白血病病毒的基础上,用PCR方法扩增gp85基因,长度为921 bp的DNA片段,与J亚群禽白血病标准毒株序列比对同源率为96.4%.将该片段连接到pET28a表达载体上,构建了重组表达质粒pET28a-S1-Jgp85,对质粒测序后分析后,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析,表达出约为40 kD的融合蛋白.Western blot结果表明,表达产物可以与ALV-J阳性血清发生特异性反应.以纯化的His-Jgp85重组蛋白为包被抗原,建立间接ELISA方法,用于J亚群禽白血病的临床诊断.本研究对抗原包被浓度,待检血清稀释浓度,酶标抗体浓度,特异性试验及临界值等条件进行优化,对优化后的ELISA检测方法进行了临床应用试验.本研究建立了能特异性检测J亚群禽白血病血清抗体的ELISA方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈福勇	中国农业大学动物医学院	34	288	10.0	15.0
2	余多	中国农业大学动物医学院	2	6	2.0	2.0
3	王李梁	中国农业大学动物医学院	2	4	1.0	2.0
4	孙淼	中国农业大学动物医学院	5	33	3.0	5.0
5	李金彩	中国农业大学动物医学院	1	3	1.0	1.0