动物病原大肠杆菌K88的绿色荧光蛋白基因标记及其稳定性研究

• 作者: 刘波 蓝江林 车建美
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌K88 绿色荧光蛋白 gfp/luxAB基因
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 198-204,209
• 分类号: Q95
• 字数: 5748字
• 语种: 中文

摘要

成功地将gfp/luxAB双标记基因整合到K88染色体上,得到绿色荧光蛋白基因标记的大肠杆菌K88:gfp/lux,其菌体和菌落形态与原始菌株K88完全一致,引入的新质粒不影响菌株的基本形态.从含gfp基因的质粒DNA和K88:gfp/lux基因组DNA上均可扩增出大小约700 bp的gfp基因片段.大肠杆菌特异性基因检测结果表明,从大肠杆菌K88和K88:gfp/lux基因组DNA上均扩增出大小约260 bp的大肠杆菌特异性基因片段,说明gfp基因标记后的菌株均为大肠杆菌.在相同的培养条件下,K88:gfp/lux和K88的生长曲线的变化趋势基本相同.通过检测肠毒性基因(estA)发现,从大肠杆菌K88和K88:gfp/lux基因组DNA上均扩增出大小约158 bp的肠毒性基因片段,说明gfp基因标记后的菌株在肠毒性方面未发生变化.在无选择压力条件下将K88:gfp/lux菌株每隔12 h连续转接10次后,所有菌落均保持着均匀并且强烈的绿色荧光,说明标记基因在K88:gfp/lux中的表达稳定性很高.K88:gfp/lux和K88在中性偏酸性的环境中生长较好,当初始pH值偏碱性时,生长较差.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘波	福建省农业科学院农业生物资源研究所	496	4446	29.0	44.0
2	蓝江林	福建省农业科学院农业生物资源研究所	78	905	17.0	25.0
3	车建美	福建省农业科学院农业生物资源研究所	85	644	14.0	19.0