骨髓间充质干细胞干预对缺血再灌注诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响

• 作者: 刘楠梅 张金元 王巍巍 田军 程劲 胡大勇
• 来源期刊: 中国中西医结合肾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 急性肾损伤 骨髓间充质干细胞 缺血再灌注 肾小管上皮细胞
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 581-585,后插1
• 分类号: R6
• 字数: 3815字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-587X.2010.07.006

摘要

目的:观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)诱导的急性肾损伤模型小鼠肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTECs)凋亡的保护作用及机制.方法:Percoll密度梯度离心结合贴壁培养法有效分离出CS7BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞(mMSCs).雄性C57BL/6小鼠45只,分为正常对照组(15只)、I/R组(15只、央闭双侧肾蒂30 min开放)、I/R+mMSCs组(15只、夹闭双侧肾蒂30 min开放的同时尾静脉注射mMSCs).造模并干预后,于1 d、2 d、3 d,7 d、14 d分别处死部分小鼠,留取动脉血及肾组织,检测血尿素氮(BUN)及肌酐(Scr),制作肾组织切片行HE染色进行肾小管损伤程度评分,TUNEL法检测RTECs的凋亡,Western Bloxt法检测建模后第2天肾小管组织中Caspase-3、Bcl-2蛋白水平的表达.结果:I/R后小鼠的BUN及Scr均显著高于正常对照组,但同一时间点I/R+mMSCs组小鼠的BUN及Set水平较I/R组为低,以术后第7天差异最为显著(P<0.01).肾小管损伤程度评分也有着显著降低.TUNEL检测表明I/R可诱导Rm旺发生明显的凋亡,以术后第2天凋亡指数(apoqtosis index,AI)最高(46.71±11.20)(P<0.01),而mMSCs干预可显著降低各时间点RTECs的凋亡水平(P<0.05或P<0.01),至14 d时AI基本恢复至对照组水平.Western blot进一步显示:I/R+mMSCs组小鼠的肾组织中Caspase-3蛋白水平明显下降(1.16±0.33,P<0.01),而Bcl-2水平却有明显增高(0.94±0.27,P<0.01).结论:移植的MSCs对I/R诱导的肾损害小鼠RTECs凋亡具有抑制作用,从而有利于肾小管损伤的早期恢复,其保护机制可能与抑制Caspase-3表达,上调Bcl-2表达有关,但其细胞学和分子机制还有待进一步研究.