重组hIL-10质粒构建及其在毕赤酵母SMD1168中的表达和纯化

• 作者: 姚新生 孙万邦 封建凯 杜联峰 王胜香 罗军敏 陈富超 黄俊琼
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: hIL-10 质粒构建 毕赤酵母 基因表达
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 168-172
• 页数: 5页
• 分类号: Q94
• 字数: 3410字
• 语种: 中文

摘要

构建重组hIL-10真核表达载体,探索在毕赤酵母中的表达,为进一步研究hIL-10生物学功能及临床应用奠定基础.PCR扩增目的基因hIL-10cDNA,经EcoR I/Xba I双酶切后,将其亚克隆至同样双酶切的载体pPICZaA中,构建表达质粒pPICZaA-hIL-10;电转化法,将其转入毕赤酵母SMD1168,甲醇诱导Mut~+型转化子基因表达;对目的蛋白进行检测及纯化.扩增出了目的基因hIL-10 cDNA,重组质粒pPICZaA-hIL-10经酶切鉴定和序列测定正确;表达产物经SDS-PAGE分析在42.0 kD处可见较浓染条带,Western blotting分析可见特异条带;ELISA检测72 h上清液中目的蛋白浓度可达1.973 mg/L;纯化后目的蛋白纯度达67.0%.实现了重组hIL-10在毕赤酵母SMD1168中的成功表达和初步纯化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄俊琼	遵义医学院免疫学教研室	33	164	6.0	11.0
2	罗军敏	遵义医学院免疫学教研室	80	320	10.0	13.0
3	孙万邦	遵义医学院免疫学教研室	102	518	12.0	17.0
4	姚新生	遵义医学院免疫学教研室	76	410	12.0	17.0
5	杜联峰	遵义医学院免疫学教研室	19	82	6.0	8.0
6	王胜香	遵义医学院免疫学教研室	4	22	2.0	4.0
7	陈富超	遵义医学院免疫学教研室	6	38	3.0	6.0
8	封建凯	遵义医学院免疫学教研室	2	25	2.0	2.0