体外诱导人骨髓间充质干细胞转化为心肌样细胞的基因表达

• 作者: 姜辉 王辉山 汪曾炜 朱洪玉 宋恒昌 张南滨
• 来源期刊: 沈阳部队医药
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓 人 间充质干细胞 5-氮胞苷 心肌细胞 基因表达
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 页码范围: 5-7,I0001
• 页数: 4页
• 分类号: R329.2

摘要

为观察5-氮胞苷在体外诱导人骨髓间充质干细胞（MSCs）转化为心肌样细胞的ANP、BNP、α—skeletal actin、MLC-2v、GATA-4和Nkx2．5基因表达，取非血液疾病的5例胸科手术患者术中已切除掉的肋骨，抽取骨髓；利用淋巴细胞分离液行密度梯度离心法和差异贴壁法进行分离、提纯MSCs，并进行培养扩增。用流式细胞仪对第2代的MSCs细胞表面抗原进行测定。应用10μmol／L5-氮胞苷对第2代的MSCs诱导24h，于诱导后1、2、3、4周，用逆转录-聚合酶链反应（PCR）检测ANP、BNP、α-skeletalactin、MLC-2v、GATA-4和Nkx2．5基因表达。结果表明，3份第2代MSCs样本重复测定，表达CD29、CD44，不表达CD34、CIM5。以5-氮胞苷诱导培养24h后，MSCs形态和排列方式发生明显变化，诱导1周后，细胞体积增大，多呈长梭形，平行排列；诱导2周后，细胞变为短柱状，突起位于两端，相邻细胞的突起紧密接触；诱导3周后，短柱状细胞的突起相互连接，部分细胞可见类肌管样结构；诱导4周后，细胞体积变小，可见由几个细胞连接形成的多核肌管样结构。诱导组细胞ANP、BNP、α—skeletalactin、MLC-2v、GATA-4和Nkx2．5的PCR产物凝胶电泳呈阳性，对照组为阴性；诱导组基因表达量均随着时间延长逐渐增加。结论：5-氮胞苷可诱导MSCs向心肌样细胞转化，处于祖心肌细胞和分化的心肌细胞之间，并可能具有心肌细胞的功能。