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摘要:
目的 探讨阳离子脂质体介导的P27抑癌基因对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞增生的抑制作用.方法 收集斜视患者矫正手术过程中获取的球筋膜囊组织制备成组织块,采用贴壁法在DMEM+质量分数10%胎牛血清培养液中进行培养和传代.采用脂质体介导的方法,将构建的增强型绿色荧光蛋白(pEGFP)-N1 P27真核表达质粒转染体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞为pEGFP-N1 P27转染组,同时以重组质粒pEGFP-N1的空质粒转染组为空载体组,另设部分未转染的成纤维细胞为未转染组.Western blot法检测P27蛋白在人眼球筋膜囊成纤维细胞中的表达,用流式细胞技术进行细胞周期分析,MTT法检测P27基因对培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞活性的影响,检测值以细胞的吸光度(A490)值表示.结果 荧光倒置显微镜下见转染成功的成纤维细胞呈绿色荧光.Western blot检测显示,pEGFP-N1 P27转染组中可见宽大的蛋白条带,证实人眼球筋膜囊成纤维细胞在蛋白水平表达P27基因.细胞周期分析结果表明,pEGFP-N1 P27转染组73.16%的人眼球筋膜囊成纤维细胞处于G0-G1期,26.84%处于S期,而空载体组的人眼球筋膜囊成纤维细胞在G0-G1期、S期者分别为63.29%和58.16%,未转染组分别为36.71%和41.84%.MTT法检测表明,pEGFP-N1 P27转染组人眼球筋膜囊成纤维细胞的A490值为0.079±0.054,明显低于空载体组的0.127±0.106和未转染组的0.180±0.007,差异均有统计学意义(P=0.000,P=0.011).结论 转染的P27基因对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞的增生具有抑制作用,并能够抑制成纤维细胞的活性.
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文献信息
篇名 体外转染P27抑癌基因抑制人眼球筋膜囊成纤维细胞增生的研究
来源期刊 眼科研究 学科 医学
关键词 抑癌基因P27 人眼球筋膜囊 成纤维细胞 基因转染 脂质体
年,卷(期) 2010,(12) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 1119-1123
页数 分类号 R777.301
字数 4907字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1003-0808.2010.12.004
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李静敏 大连医科大学附属二院眼科 37 201 9.0 12.0
2 孙璐 大连医科大学附属二院眼科 13 25 3.0 4.0
3 骆玮 大连医科大学附属二院眼科 3 24 3.0 3.0
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抑癌基因P27
人眼球筋膜囊
成纤维细胞
基因转染
脂质体
研究起点
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期刊影响力
中华实验眼科杂志
月刊
2095-0160
11-5989/R
大16开
郑州市纬五路7号河南省眼科研究所&河南省立眼科医院院内
36-13
1980
chi
出版文献量(篇)
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