禽流感病毒M2e特异性多肽ELISA检测方法的建立

• 作者: 何家惠 侯继波 徐公豹 邓碧华 郑其升
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 M2e 多肽 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 疾病防治
• 页码范围: 77-81
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 4897字
• 语种: 中文

摘要

本研究人工合成禽流感病毒H5Nl亚型M2蛋白的膜外区(M2e),并偶联至半抗原载体血蓝蛋白(KLH),免疫SPF鸡,共免疫3次,每次间隔两周.所获得的阴阳性血清用于ELISA方法的建立,通过方阵滴定确定了人工合成的23肽包被96孔ELISA板的最佳浓度为5μg/mL;1%BSA为封闭液,37℃封闭3 h;被检测血清的最佳稀释度为1:400,一抗反应时间为37℃,45 min;二抗反应时间为37℃30 min;选用TMB为底物,显色15 min,用2 mol/L H2SO4为终止液为检测血清中抗M2e抗体滴度奠定基础.根据建立的ELISA方法,检测3次免疫2周后的SPF鸡血清中抗M2e抗体,血清开始1:100倍稀释之后做倍比稀释,测得平均滴度分别为1:13 500和1:20 500.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯继波	江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心	66	346	10.0	16.0
2	何家惠	江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心	32	375	10.0	18.0
3	邓碧华	江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心	13	41	4.0	5.0
4	郑其升	江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心	19	47	3.0	6.0
5	徐公豹	江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心	2	3	1.0	1.0