稳定表达人巨细胞病毒pUL49蛋白人胚肺成纤维细胞系的建立

• 作者: 员月明 周天鸿 宫君原 张欣 李弘剑 李月琴 肖小平 邹弈
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒 逆转录病毒 稳定细胞系
• 年，卷（期）: 2010,（23）
• 页码范围: 3521-3525,3529
• 页数: 6页
• 分类号: R34|Q737
• 字数: 4004字
• 语种: 中文

摘要

目的 用逆转录病毒载体介导的基因转移方法,建立稳定表达人巨细胞病毒(HCMV)UL49基因的HELF细胞系.方法 首先应用KT-PCR从感染HCMV的HELF细胞RNA中扩增UIA9基因,克隆到逆转录病毒载体pLEGFP-N1上,以此构建重组逆转录病毒栽体pLEGFP-N1-FLAG-uL49,并转染AmphoPackTM-293细胞,收集逆转录病毒,感染HELF细胞,经G418抗性筛选出阳性细胞.结果 经IFA、KT-PCK及Wcstem blot检测到UIA9基因在稳定细胞系中表达.结论 HELF-PLEGFP-N1-FLAG-UL49稳定细胞系构建成功.此细胞系为进一步研究HCMV pUL49蛋白的功能提供了一个有力工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李月琴	暨南大学生命科学技术学院	81	309	10.0	13.0
2	李弘剑	暨南大学生命科学技术学院	40	186	8.0	11.0
3	张欣	暨南大学生命科学技术学院	33	93	6.0	8.0
4	宫君原	暨南大学生命科学技术学院	5	1	1.0	1.0
5	邹弈	暨南大学生命科学技术学院	2	1	1.0	1.0
6	员月明	暨南大学生命科学技术学院	3	3	1.0	1.0
7	肖小平	暨南大学生命科学技术学院	3	4	1.0	2.0