p53基因表达沉默的稳定Vero细胞系的建立及特性分析

• 作者: 刘庆伟 刘超 沈阳 邱亚峰 马志永
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: p53 慢病毒载体 RNA干扰 筛选 细胞系
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 83-88
• 分类号: Q2
• 字数: 5056字
• 语种: 中文

摘要

利用慢病毒介导的RNA干扰技术,建立稳定沉默p53基因的Vero细胞模型.设计针对p53基因的shRNA序列,构建p53 shRNA慢病毒载体并感染Vero细胞;嘌呤霉素筛选阳性细胞,局部消化法挑选细胞克隆;利用RT-PCR和Western blot检测p53的表达水平;利用虫荧光素酶报告系统,分析p53的转录激活功能.RT-PCR和Western blot结果显示,慢病毒介导的shRNA有效地沉默p53基因表达;与对照组细胞相比,干扰组细胞的p53的转录激活功能明显降低.慢病毒介导的shRNA高效、稳定地沉默了p53基因的表达,同时,有效地降低了p53的转录激活功能,为研究p53的生物学功能提供了有利的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马志永	中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生研究室	26	137	7.0	10.0
2	刘超	中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生研究室	32	256	9.0	15.0
3	沈阳	中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生研究室	7	27	2.0	5.0
4	邱亚峰	中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生研究室	11	43	3.0	6.0
5	刘庆伟	中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生研究室	2	1	1.0	1.0