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siRNA干扰SLC7a8对NRK-52E细胞摄取左旋多巴的影响
siRNA干扰SLC7a8对NRK-52E细胞摄取左旋多巴的影响
作者:
周希
张怀勤
张敏
施翔翔
杨德业
黄晓燕
黄芳
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
RNA干扰
基因,SLC7a8
高血压
肾小管上皮细胞
左旋多巴
摘要:
目的:通过RNA干扰(RNAi)技术选择性下调高血压相关基因SLC7a8的表达,探讨对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)摄取左旋多巴的影响.方法:设计并合成3个针对大鼠SLC7a8基因的特异性siRNA片段(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3),以含非特异性编码序列的siRNA-con为对照.将上述3个片段及阴性对照通过阳离子脂质体法转染至NRK-52E内,通过流式细胞仪估算转染效率后经RT-PCR初步筛选高效率干扰片段,用Western blotting检测蛋白水平的干扰效率,采用紫外分光光度法检测空白对照组(blank)、siRNA-con转染组和SLC7a8基因特异性沉默组不同时点(6、12、24、36、48、60、72、120 min) NRK-52E内左旋多巴的浓度.结果:流式细胞仪测定siRNA转染NRK-52E效率为94%,RT-PCR初步筛选结果显示siRNA-1、3干扰效率较高,Western blotting检测显示siRNA-3组在蛋白水平的干扰效率较高,而对照组siRNA-con与空白对照组(blank)的SLC7a8 表达差异不明显.通过紫外分光光度法检测NRK-52E对左旋多巴的吸收结果显示干扰组不同时点(6、12、24、36、48、60、72、120 min)细胞内左旋多巴浓度均低于siRNA-con转染组和空白对照组;对照组siRNA-con与空白对照组相比则无明显差异.结论:RNA干扰技术能选择性下调大鼠肾小管上皮细胞SLC7a8的表达水平;SLC7a8基因特异沉默后NRK-52E对左旋多巴的摄取在各个不同时点(6、12、24、36、48、60、72、120 min)均降低.
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篇名
siRNA干扰SLC7a8对NRK-52E细胞摄取左旋多巴的影响
来源期刊
中国病理生理杂志
学科
医学
关键词
RNA干扰
基因,SLC7a8
高血压
肾小管上皮细胞
左旋多巴
年,卷(期)
2010,(3)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
504-508
页数
5页
分类号
R544.1|R394.1
字数
3429字
语种
中文
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高血压
肾小管上皮细胞
左旋多巴
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研究来源
研究分支
研究去脉
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期刊影响力
中国病理生理杂志
主办单位:
中国病理生理学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1000-4718
CN:
44-1187/R
开本:
大16开
出版地:
广东省广州市黄埔大道西601号
邮发代号:
46-98
创刊时间:
1985
语种:
chi
出版文献量(篇)
11461
总下载数(次)
3
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