转染Akt1基因对缺血再灌注大鼠心肌线粒体通透性转换的影响

• 作者: 夏勇 张卓琦 徐通达 朱红 李东野 潘德锋 王静 罗园媛 陈丹
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因 Akt1 再灌注损伤 线粒体通透性转换
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 80-85
• 页数: 6页
• 分类号: R322
• 字数: 4524字
• 语种: 中文

摘要

目的: 研究Akt1基因对缺血再灌注(I/R)损伤心肌细胞的保护作用,并探讨Akt1基因对心肌I/R损伤时线粒体通透性转换(MPT)功能的影响.方法: 使用结扎/松解左冠状动脉前降支法,结扎冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min,建立大鼠在体心肌I/R损伤模型.40只雄性SD大鼠随机分为5组,每组8只:假手术对照组(control组)、心肌缺血/再灌注组(I/R组)、转Akt1基因+I/R组(Ad-gene组)、空载体+I/R组(Ad-blank组)、转Akt1基因+I/R+Akt抑制剂组(Ad-inhibitor组).Ad-gene组术前48 h开胸心肌内直接分点注射脂质体Akt1质粒复合物,control组和I/R组分别注射同等体积磷酸盐缓冲液(PBS),Ad-blank组注射等体积脂质体,Ad-inhibitor组注射等体积脂质体Akt1质粒LY294002混合物.观察转染Akt1基因对大鼠I/R心脏乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)释放、心肌细胞凋亡、Akt1表达、线粒体和胞浆内细胞色素C(Cyc-C)表达以及MPT的影响.结果: Control组可见Akt1表达,但明显低于其余各组;与control组相比较,其余各组心肌细胞凋亡指数(AI)、LDH和CK均增高;与control组相比较, 其余各组Cyc-C较胞浆表达增加而线粒体内表达减少. Ad-gene组Akt1蛋白表达较control组、I/R组、Ad-blank组及Ad-inhibitor组均增加;Ad-gene组AI、LDH和CK较I/R组、Ad-blank组及Ad-inhibitor组均显著减少,但仍高于control组;Ad-gene组 Cyc-C较I/R组、Ad-blank组以及Ad-inhibitor组胞浆内表达减少而线粒体内表达增加;Ad-gene组较IR组、Ad-blank组和Ad-inhibitor组在540 nm处吸光度值增高,但明显低于control组.I/R组、Ad-blank组以及Ad-inhibitor组Akt1、Cyc-C、AI、LDH和CK以及在540 nm处吸光度值比较均无显著差异.结论: 转染Akt1基因对I/R损伤心肌细胞具有保护作用,该作用可能与Akt1抑制I/R诱导的心肌线粒体膜通透性转换,从而保护线粒体的功能有关.