沙眼衣原体多形外膜蛋白PmpG的克隆、表达、纯化及鉴定

• 作者: 刘全忠 刘原君 姚卫峰 李燕 盛彩虹 齐蔓莉
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 衣原体,沙眼 细菌外膜蛋白质类 克隆,分子 重组蛋白质类
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 页码范围: 568-571
• 分类号: R75
• 字数: 3481字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2010.08.018

摘要

目的 克隆、表达、纯化E型沙眼衣原体多形外膜蛋白(PmpG),并鉴定其免疫原性.方法 用PCR技术扩增从E型沙眼衣原体中提取的PmpG基因片段,再将其定向插入到原核表达载体PET30a(+)中,构建重组表达质粒,将其转化入E.coli DH5α中,并用酶切分析、PCR扩增及基因序列测定等对重组质粒进行鉴定,诱导表达后用SDS-PAGE及Western印迹进行鉴定,然后进行蛋白纯化,并免疫BALB/c小鼠鉴定其免疫原性.结果 PCR扩增出约1092 bp DNA片段,序列测定证实与基因库的E型沙眼衣原体一致;表达产物的相对分子质量为55 000,与预期分子量相符,Western印迹证实表达产物为特异性蛋白,纯化后的蛋白免疫小鼠获得抗原特异性抗体.结论 构建的PmpG原核表达载体在大肠杆菌中得到了表达,且具有免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘原君	天津医科大学总医院皮肤性病科	65	208	7.0	9.0
2	姚卫峰	天津医科大学总医院皮肤性病科	4	7	2.0	2.0
3	刘全忠	天津医科大学总医院皮肤性病科	170	703	11.0	17.0
4	李燕	天津医科大学总医院皮肤性病科	42	149	8.0	9.0
5	盛彩虹	天津医科大学总医院皮肤性病科	6	30	4.0	5.0
6	齐蔓莉	天津医科大学总医院皮肤性病科	45	177	7.0	10.0