牛分支杆菌ESAT-6/Ag85B/Mtb8.4基因与牛IL-2基因融合表达

• 作者: 刘艳环 孙金霞 张广雷 李庆超 李海涛 苗利光
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 牛IL-2 牛分支杆菌 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 67-70
• 分类号: S852.61
• 字数: 3275字
• 语种: 中文

摘要

本研究拟制备牛IL-2与牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因的融合蛋白.从患结核病鹿的肺组织中分离牛分支杆菌并提取基因组DNA,PCR扩增牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因;提取牛淋巴细胞,经总RNA提取、RT-PCR得到了IL-2基因片段.经测序鉴定后,将4个目的片段重组,构建原核表达载体,并对表达的融合蛋白进行鉴定.克隆出了IL-2,以及牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因;构建了原核表达载体pME290-SDCZ,并表达出了融合蛋白;Westem印迹结果证实该重组蛋白能与抗牛分支杆菌多克隆抗体发生特异免疫结合反应.制备了牛IL-2与牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4融合蛋白,本研究为下一步研制重组牛结核亚单位疫苗奠定了基础.