上西早生柿ETR5基因RNAi植物表达载体构建及遗传转化研究

• 作者: 于丛丛 宋春丽 陈佳 马俊莲
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 上西早生柿 ETR5 RNAi 植物表达载体 转基因
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 页码范围: 84-87
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2989字
• 语种: 中文

摘要

据已测序的上西早生柿ETR5基因序列,设计了2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,PCR扩增到2个ETR5-Uenishiwase基因片段.2个片段经单酶切消化后连接成反向互补的大片断.连接片断经双酶切消化后,定向连接到植物表达载体pSMAK321的35S启动子和NOS终止子之间,构建成Uenishiwase-ETR5基因的RNA干扰植物表达载体.载体质粒经酶切鉴定正确后通过冻融法转入根癌农杆菌EHA101中.以上西柿组培苗叶片为外植体,优化遗传转化体系,结果表明:农杆菌重悬液和共培养基中均添加200 μmol/L的AS及Spc梯度筛选能有效提高转化率.转化植株经PCR检测得到7株阳性植株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马俊莲	河北农业大学食品科技学院	59	494	11.0	19.0
2	宋春丽	河北农业大学中兽医学院	28	186	7.0	12.0
3	于丛丛	河北农业大学食品科技学院	1	6	1.0	1.0
4	陈佳	河北农业大学食品科技学院	3	17	2.0	3.0