兔脂肪干细胞体外构建组织工程软骨:负载胰岛素样生长因子1基因的作用

• 作者: 孙仰白 张传辉 李建军 杨军
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 胰岛素样生长因子1 软骨组织工程 脂肪间充质干细胞 软骨细胞 基因转染
• 年，卷（期）: 2010,（28）
• 页码范围: 5131-5135
• 分类号: R318
• 字数: 5491字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.28.001

摘要

背景:前期研究证实在二维培养条件下,转染胰岛素样生长因子1基因能够明显促进脂肪间充质干细胞的增殖.目的:在前期研究基础上,利用壳聚糖明胶复合物为立体培养的载体,观察三维立体培养条件下胰岛索样生长因子1基因转染对兔脂肪间充质干细胞增殖能力的影响,体外初步构建组织工程软骨.方法:分离、培养成年新西兰大耳白兔脂肪间充质干细胞,构建稳定表达pcDNA3.1-IGF-1的细胞株,鉴定后接种于壳聚糖三维支架材料上,分组培养:空白对照组接种未转染基因的脂肪间充质干细胞,空载体组接种胰岛素样生长因子1诱导条件下培养的脂肪间充质干细胞,基因转染组接种稳定转染胰岛素样生长因子1基因的脂肪间充质干细胞,培养1周.扫描电镜观察各组细胞形态,MTT法绘制细胞增殖曲线,CM-DiL荧光标记后观察细胞增殖比率及细胞分布,DMMB法测定糖胺聚糖含量.结果与结论:成功构建稳定表达pcDNA3.1-IGF-1的细胞株,转染后的细胞株在mRNA水平上获得胰岛素样生长因子1的表达,并成功翻译为蛋白.扫描电镜示各组细胞在支架上贴附、伸展良好,基因转染组细胞生长最为旺盛.MTT及GAG检测结果提示,基因转染组增殖能力最强、糖胺聚糖最高(P<0.01),荧光标记显示细胞分布均匀,存活率高(P<0.05).提示胰岛素样生长因子1基因转染联合三维立体培养能够有效促进兔脂肪间充质干细胞的增殖和软骨细胞外基质糖胺聚糖的分泌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张传辉		5	21	3.0	4.0
2	杨军		1	2	1.0	1.0
3	李建军		1	2	1.0	1.0
4	孙仰白		1	2	1.0	1.0